高效液相色谱法HPLC在食品安全检测中的应用.pdf
吕伟利
摘 要： 伴随社会经济的高速发展及人民生活水平的不断提升，针对食品安全，人们提出了更高的要求。作为一种新型分离分析技术，高效液相色谱技术在已知化合物内的分析应用可达到70%～80%。因该项技术具有分辨率高、分析速度快、精确度及重复性良好的特点，已成为食品领域最为关键的检测分析方法。为此，本文在充分掌握高效液相色谱技术原理的基础上，对食品检测中高效液相色谱技术的应用进行了分析与探讨，以期全面提升食品安全。
关键词： 食品检测；高效液相色谱；食品安全
在中国自古以来就有“民以食为天”的说法，食品和人之间存在极为密切的关系。作为人类生存、生活的根本基础，食品研究意义重大。自改革开放以来，我国食品加工领域工业化水平越来越高，进而加重了现代社会食品安全问题。目前，全世界每年产生的食品污染病例高达7000万例以上，为此，必须重视食品安全问题，加大食品安全检测力度。在食品生产环节，为满足食品某项属性要求，往往需要适量添加特定食品添加剂，如防腐剂、抗氧化剂及人工合成色素等，但此类添加剂的掺加，都会不同程度地影响食品安全。除此之外，因环境污染等问题，也会对植物、生物造成严重污染，从而通过食品链作用也会成为危害食品安全的重要因素。为此，必须重视食品安全问题，有效解决食品安全问题，只有这样才能提高食品检测技术水平，才能提高食品安全监管水平，才能提高食品安全问题重视程度，才能进一步提高人们的生活质量及确保身体健康。
一、高效液相色谱技术原理
食品检测是保证食品安全的重要手段。高效液相色谱法也被叫做高效液相层析，HPLC为其简称。自上个世纪60、70年代高效液相色谱技术诞生，伴随其技术水平的不断提升，已成为食品检测中应用较为广泛的分离分析技术之一。作为在经典色谱法基础上发展而言的高效液色譜法，其充分引入了气相色谱原理，技术方面，流动相更改为高压输送。色谱柱是选用特定方式通过小粒径填料进行填充形成，进而有效提升色谱柱效果。除此之外，色谱柱后还与检测器（灵敏度高）连接，能够连续检测流出物。
相比气相色谱法，高效液相色谱法具有更为广泛的应用范围，试样挥发性、热稳定性并不会对其造成影响。同时，具有种类较多的流动相，可利用流动相达到良好分离效率。通常情况下，在室温下即可完成分析，无需高柱温。其特点为分辨率高、分析速度快、重复性好，同时可重复利用色谱柱，实现自动化操作，具有较高精确度。
二、食品检测中高效液相色谱的应用
做好食品检测工作，是保证食品安全的重要手段。高效液相色谱法在食品检测中的应用主要集中于黄曲霉毒素、N-亚硝胺等方面的检测，具体应用效果如下：
1、黄曲霉毒素检测
作为食品检测的主要对象之一，黄曲霉毒素产生的直接原因为食物或食物原料存放时间过长，导致其变质。食物长时间放置将导致其自身黄曲霉菌繁殖速度进一步加快，从而出现黄曲霉毒素。经检测实践可得，黄曲霉毒素结构类型共8类，具有较强毒性，通过动物实验分析，几微克黄曲霉毒素将引发肝癌。
针对黄曲霉毒素，选用高效液相色谱法进行测定时，色谱柱以Sil-x-II为准，室温条件下淋洗剂可选取氯仿-异辛烷，一次冲出黄曲霉素的主要结构内容，如B1、B2、G1、G2等，通常以7min为其分析时间。一次将黄曲霉毒素含量、结构类型检测出来。相比气相色谱技术，样品挥发性、热稳定性等都不会影响液相色谱检测结果，只需将检测样品进行溶液制作，且利用各类液相色谱法就能够达到分离的目的。
2、N-亚硝胺检测
在腌制类食品中，如腊肉、腊肠等，为保证腌制食品色泽、口感良好，往往会存在掺加硝酸盐、亚硝酸盐等现象，从病理学角度分析，硝酸盐并不具备危害性，但当添加量超过一定比例后，因还原作用影响，肉制品极易产生N-亚硝胺，于人体健康而言，N-亚硝胺具有较大危害，长期使用此类肉制品，将引发肝癌、结肠癌等疾病。气相色谱法是N-亚硝胺检测的传统手段，但此类检测方法，只能检测样品的挥发性N-亚硝胺，精准度较低，同时检测时间过长，通常在1h以上，严重影响检测质量。而高效液色谱法的应用，不仅能够提高检测精准度，还能大幅度缩短检测时间，仅需13min即可完成整个检测过程。
3、多环烃与杂环芳烃检测
多环烃与杂环芳烃等往往产生于加工制作油炸、烧烤肉制品内，此类污染物内存有典型性致癌物，如二苯并芘、3.4-苯并芘等，如检测其有害物质含量时，选用氧化铝层析柱，则检测时间过长，为减短检测时间，可选用高效液相色谱法。其检测主要内容为：（1）色谱柱填充剂为十二烷、化学键合薄壳型硅胶；（2）固定相为Zipax担体上涂渍0.5%AgNO3；（3）淋洗液为乙青-正己烷，以此进行分离。
4、芳香胺检测
作为人工合成色素的重要原材料，长期大量摄入芳香胺将对人体代谢系统产生严重影响，甚至导致膀胱癌等疾病发生。根据国家食品安全法规定，严禁添加芳香胺，因此，做好芳香胺检测工作极为关键。在实际分离检测过程中，色谱柱可选用PermaphaseETH，选取甲醇-环戊烷作为移动相。而针对2.6-二甲苯胺此类有毒物质，分离检测时的色谱柱可选用Aurapak，淋洗剂可选用异丙醇-乙烷，检测时间可控制在5min以内。
5、氨基酸检测
作为生物体主要生命元素，氨基酸是酶、蛋白质的主要构成成分，对食品内氨基酸含量进行精确、灵敏地检测，对保证食品安全意义重大。当前，主要选用邻苯二甲醛（OPA）-9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）进行氨基酸柱前衍生，氨基酸含量检测可选用RP-高效液相色谱法。由此测定，三个浓度不同梯度氨基酸标准溶液具有良好线性关系，且在0.1min以内控制样品保留时间绝对误差，4%以内控制重现性RSD值，加标回收率可控制在90%～110%。
三、结束语
综上所述，伴随我国国民经济的迅速发展，食品安全问题也得到了人们的普遍关注。将高效液相色谱法合理应用于食品检测，可有效提高检测的精确性，有效解决食品安全问题，促进我国食品检测事业的发展，为人们提供更多安全、放心的食品。
参考文献
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